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《幕后真凶》是一部以缉毒警察为题材的案件悬疑剧，剧情跨越了20多年，讲述了两代缉毒警察的故事。三十多年前，在松江土地上发生了一起生物制剂非法出境案，随着此案的发生，缉毒刑警计春生失踪，卧底警察楚江河生死不明，而作为案件核心的CH型生物试剂不翼而飞，此案成了一桩悬案。
而就在二十多年后的现在，当年的缉毒支队成员高平率领着楚江河的儿子楚白以及一众干警势要查清当年的真相，化工广场大爆炸、四名被绑架的孩子、同一时间互相杀人的死者、摩天轮焚尸等一系列奇案的发生让真相逐渐浮出水面，但随着接近真相，一直藏在暗中的那双手使这桩跨越二十余年的大案更加扑朔迷离起来，随着刑警米乐儿的失踪，众人这才意识到，藏在黑暗背后的那双手，竟然是“他”！最终，这个尘封20年的大案终于侦破，而背后的真正元凶却是谁也未曾猜想到的。
可无论如何，楚白完成了自己的梦想，为当年卧底的父亲正名，让父亲住进了烈士陵园，而自己，最终继承了父亲的警号。
镇国将军嫡女徐楚韵因青梅竹马的副将孟琦为救自己而死，从此封心锁爱时至徐家发生危机，徐楚韵为了保全徐家自愿入京等待皇帝赐婚。执棋之人，身亦在局中，赤子之心，何以藏算谋?在东宫各自谋划着自己的未来。
民国时期，检骨师曹老（孔庆三 饰）带徒弟郑宇（李璟羿 饰）应邀为王家检骨，却反被算计，卷入一场迷离血案，师徒俩为自救，也为求正义公平，展开报复，揭开了一场虐心的时代悲剧。
傅家全家遇害，唯有独女傅照雪幸存，而证据却指向昔日恋人顾京州。她换脸归来化身林千语嫁进顾家成为顾京州大嫂，一步步探查顾家隐藏的秘密，她蓄意接近曾经的恋人顾京州，与之展开一段禁忌拉扯，引得顾家兄弟阋墙。随着真相的揭开，林千语与顾京州终难掩真心再生情愫，家仇与爱恨，在水落石出的那一刻热烈绽放……
